BrdU

EdU

原理

 BrdU為胸腺嘧啶衍生物，可與胸苷競爭摻入DNA，再用抗BrdU單抗，經(jīng)ICC染色，顯示增殖細(xì)胞。

EdU是一種胸腺嘧啶脫氧核苷類似物，可代替胸苷摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過EdU與熒光標(biāo)記特異性反應(yīng)快速檢測DNA復(fù)制活性。

檢測分子

大

很小，BrdU抗體的1/500

檢測方式

免疫反應(yīng)

化學(xué)反應(yīng)

影響其他標(biāo)記

是

否

DNA變性

需要

不需要

實(shí)驗(yàn)時(shí)間

過夜

2.5h

檢測敏感度

一般

靈敏

植物細(xì)胞檢測

需消化細(xì)胞壁，細(xì)胞壁消化酶常含雜質(zhì)，甚至破壞細(xì)胞形態(tài)表征，降低準(zhǔn)確性

無需消化細(xì)胞壁即可完成檢測，檢測便捷準(zhǔn)確

優(yōu)缺點(diǎn)

破壞了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，影響了其他染料的結(jié)合染色，出現(xiàn)染色彌散，準(zhǔn)確性降低

染料易擴(kuò)散特異性好，不破壞DNA和核的結(jié)構(gòu)，避免樣品損傷，無需抗原抗體反應(yīng)，可準(zhǔn)確反映細(xì)胞和組織水平DNA復(fù)制活性

EdU應(yīng)用

詳情

動(dòng)物活體注射實(shí)驗(yàn)

EdU適用于各種動(dòng)物活體注射，穩(wěn)定無副作用，檢測時(shí)間可以從幾小時(shí)至數(shù)十天，也適用于石蠟或冰凍組織切片檢測，完全滿足動(dòng)物細(xì)胞增殖的檢測，是全面分析組織或器官細(xì)胞增殖的理想工具。

植物成像實(shí)驗(yàn)

EdU分子小可透過細(xì)胞壁，無需DNA變性和抗原抗體反應(yīng)，可準(zhǔn)確檢測植物生長發(fā)育分化等性狀的細(xì)胞增殖情況，其適用于各種單/雙子葉植物的細(xì)胞增殖檢測。

細(xì)胞標(biāo)記示蹤

標(biāo)記示蹤可直觀了解細(xì)胞在體內(nèi)的分布，還可追蹤其體內(nèi)的分化轉(zhuǎn)化及調(diào)控機(jī)制。EdU能競爭性地滲入正在復(fù)制的DNA分子，從而達(dá)到標(biāo)記分裂細(xì)胞的目的，簡單快速準(zhǔn)確示蹤細(xì)胞，示蹤標(biāo)記時(shí)間長達(dá)6周，遠(yuǎn)勝于BrdU。

DNA損傷修復(fù)檢測

代謝活動(dòng)和環(huán)境因素（如紫外線）等能造成人體細(xì)胞DNA分子結(jié)構(gòu)的破壞，進(jìn)而改變細(xì)胞閱讀信息和基因編碼的方式。DNA損傷修復(fù)須經(jīng)常運(yùn)行，快速改正DNA結(jié)構(gòu)的任何錯(cuò)誤。EdU可快速有效標(biāo)記，細(xì)胞核的熒光強(qiáng)度跟DNA損傷修復(fù)活性成正相關(guān)。

線粒體活性檢測

線粒體是動(dòng)物細(xì)胞的一種半自主細(xì)胞器，具有自身特異的DNA分子。這類環(huán)狀雙鏈DNA記載了線粒體的遺傳信息。采用EdU可以同時(shí)標(biāo)記線粒體DNA，結(jié)合APH即可實(shí)現(xiàn)針對線粒體DNA復(fù)制活性的檢測。

病毒增殖活性檢測

病毒DNA復(fù)制是病毒增殖的一個(gè)重要表現(xiàn)，采用EdU方法可快速檢測病毒DNA的復(fù)制活性，并掌握病毒增殖的位點(diǎn)。