-
Cell Counting Kit-8（CCK-8）細胞增殖檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號: C6005S/C6005M/C6005L/C6005XL/C6005XXL
產(chǎn)品規(guī)格: 100T/500T/3000T/10000T/5×10000T
目錄價（元）:300/700/2560/7000/25000
可替代市場同類產(chǎn)品
產(chǎn)品概述：
儲存條件
4℃避光保存，長期儲存置于-20℃，有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
Cell Counting Kit-8 簡稱 CCK8（或 WST-8）試劑盒，是一種基于 WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4- 硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）顯色反應的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
WST-8 工作原理：在電子耦合試劑存在的條件下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在 450 nm 波長處測定 OD 值，間接反映活細胞數(shù)量。
WST-8 是 MTT 的一種升級替代產(chǎn)品，和 MTT 或其它 MTT 類似產(chǎn)品如 XTT、MTS 等相比有明顯的優(yōu)點。首先，MTT 被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的甲臜不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而 WST-8、XTT 和 MTS 產(chǎn)生的甲臜都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8 產(chǎn)生的甲臜比 XTT 和 MTS 產(chǎn)生的甲臜更易溶解。再次，WST-8 比 XTT 和 MTS 更加穩(wěn)定，使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-8 與 MTT、XTT 相比線性范圍更寬，靈敏度更高。
CCK 法廣泛應用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等方面。
說明書：
UE-C6005S/C6005M/C6005L/C6005XL/C6005XXL
客戶使用反饋：
常見問題解答：
◆為什么測的吸光度值過低？
1.細胞數(shù)量過低，建議增加細胞待測數(shù)量；
2.染色難度大，建議增加CCK-8孵育時間
◆數(shù)據(jù)重復性差？
1.孔板最外圈試劑容易揮發(fā)，建議最外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用；
2.CCK-8沾壁，建議加入CCK-8后，輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻；
3.細胞數(shù)量過多或過少，建議預先在1000-100000個/孔范圍內(nèi)摸索條件；
4.孔內(nèi)氣泡干擾酶標儀檢測，檢測前需確保每個孔內(nèi)無氣泡
◆在做細胞的加藥實驗時,藥物對CCK-8測定是否有影響?
1.注意如果藥物具有還原性(如維生素C),會和CCK-8發(fā)生顯色反應,增加吸光度；
2.藥物中的金屬對CCK-8顯色有影響:當終濃度為1mM的氯化亞鉛、氧化鐵、硫酸銅會抑制5%,15%, 90%的顯色反應,使靈敏度降級。如果終濃度是10mM的話，將會100%抑制。解決辦法:首先要確認藥物是否有吸收,在含有藥物的培養(yǎng)基中加入CCK-8,測定450nm的吸光度,如果它的吸光度比不含藥物的培養(yǎng)基(加CCK-8)的吸光度高,則證明藥物有影響,可在加CCK-8之前更換培養(yǎng)基,去掉藥物的影響；
3.由于培養(yǎng)基中可能含有氧化還原反應的物質(zhì),在正式實驗之前,建議使用一個孔作一下檢測,有必要先確認培養(yǎng)基和CCK-8是否反應，一般正常的OD值應該在0.4以下
◆可否采用CCK-8法進行藥物的IC50檢測？
可以,將細胞培養(yǎng)后按照不同濃度的藥物處理一定時間后進行CCK-8檢測,根據(jù)吸光度繪制曲線,計算該藥物抑制細胞數(shù)量一半時的濃度(IC50)
◆CCK-8對于不同的細胞,靈敏度是否一樣？
不一樣,懸浮細胞較貼壁細胞難染色。對于貼壁細胞,一般加入CCK-8培養(yǎng)1-4小時吸光度已經(jīng)很高,但對于懸浮細胞則可能吸光度較低,可以通過延長CCK-8的加入時間或增加細胞數(shù)量來解決
◆若是暫不檢測OD值，該如何處理?
若暫時不測定 OD 值，可以向每孔中加入 10μL 0.1 M 的 HCl 溶液或者 1% w/v SDS 溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24 小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化
◆用CCK-8測細胞活力時每次都要做標準曲線嗎？
建議每次做，雖然細胞是一樣的，但是細胞的狀態(tài)不一定一樣。對于狀態(tài)不一樣的細胞，建議每次做標準曲線
引用及參考文獻：
1.Oncogene miR-187-5p is associated with cellular proliferation, migration,invasion, apoptosis and an increased risk of recurrence in bladder cancer
ZuweiLi ,CanbinLin,LiwenZhao,LiangZhou,XiangPan,JingQuan,XiqiPeng,WeiqingLi,HangLi,JinlingXu,WeijieXu,XinGuan,YunChen
Biomedicine & Pharmacotherapy(2018)
應用方向：細胞活性檢測：膀胱癌細胞（BC）
2.MicroRNA?572 functions as an oncogene and a potential biomarker for renal cell carcinoma prognosis
- Xiang Pan, Zuwei Li , Liwen Zhao, Jing Quan, Liang Zhou, Jinling Xu, Weiji Xu, Xin Guan, Hang Li , Shangqi Yang, Yaoting Gui
Oncology Reports(2018) 3092-3101
應用方向：細胞活性檢測：腎細胞（RCC）
- 3.Oncogene miR-154-5p regulates cellular function and acts as a molecular marker with poor prognosis in renal cell carcinoma
Lin Canbin, Li Zuwei, Chen Peijie, Quan Jing , Pan Xiang, Zhao Liwen, Zhou Liang, Lai Yulin, He Tao,Xu Weijie,Xu Jinling,Guan Xin,Li Hang, Yang Shangqi,Hu Yimin
Life Sciences(2018)
應用方向：細胞活性檢測：膀胱癌細胞（BC）
4.外泌體介導乳腺癌 MCF-7 細胞對多柔比星耐藥性的機制
張如月； 李朵璐； 楊哲； 郭金秀； 周玉冰；
藥學學報(2019)
應用方向：細胞活性檢測：MCF-7、MCF-7/Exo、MCF-7/Dox細胞
5.MS-275聯(lián)合順鉑對食管鱗狀細胞癌9706細胞氧化損傷和凋亡的影響
劉騰飛,王亞蘋,李亞,張振坤,李喆,周馨魁,張璐玉,王文杰,劉紅濤,張彥婷,關(guān)方霞,馬珊珊
鄭州大學生命科學學院
應用方向：細胞的存活率檢測：食管鱗狀細胞癌(鱗癌) EC9706細胞
6.A dual-enzymatically cross-linked injectable gelatin hydrogel loaded with BMSC improves neurological function recovery of traumatic brain injury in rats
Minghao Yao, Feng Gao, Ru Xu, Junni Zhang, Yihao Chena , Fangxia Guan
Biomaterials Science
應用方向：細胞活性檢測：BMSC
7.重組人MG53蛋白激活Akt/GSK-3β通路降低LPS誘導的hUC-MSCs氧化損傷
王亞蘋 張振坤 李喆 劉騰飛 黃團結(jié) 周馨魁 麻建杰 關(guān)方霞 馬珊珊
鄭州大學學報（醫(yī)學版）
應用方向：細胞活力檢測：人臍帶間充質(zhì)干細胞(hUC-MSCs)
8.Inonotus Obliquus Polysaccharides Induces Apoptosis of Lung Cancer Cells and Alters Energy Metabolism via the LKB1/AMPK Axis
Shuping Jiang，F(xiàn)uli Shi，Hui Lin，Ying Ying，Lingyu Luo，Deqiang Huang，Zhijun Luo
International Journal of Biological Macromolecules Volume 151, 15 May 2020, Pages 1277-1286
9.A chitosan-based thermosensitive scaffold loaded with bone marrow-derived mesenchymal stem cells promotes motor function recovery in spinal cord injured mice
Junni Zhang,Tian Cheng,Yihao Chen,Feng Gao,Fangxia Guan,Minghao Yao
Biomedical materials
10.Structure analysis of polysaccharides purified from Cyclocarya paliurus with DEAE-Cellulose and its antioxidant activity in RAW264.7 cells
QiAn，XimeiYe，YiHan，MengZhao，SiChen，XinLiu，XiangLi，ZitongZhao，YangZhang，KehuiOuyang，WenjunWang
International Journal of Biological Macromolecules(Available online 28 November 2019)
11.Dual-enzymatically crosslinked hyaluronic acid hydrogel as a longtime 3D stem cell culture system
Feng Gao,Jinrui Li,Luyu Wang,Dan Zhang,Junni Zhang,Fangxia Guan，Minghao Yao
Biomedical Materials
12.Enhanced effect of nano-monetite hydrosol on dentin remineralization and tubule occlusion
Shenglong Tan，Shangsi Chen，Yifan Wang，F(xiàn)eige Wu，Yufei Shi，Jianglin Wang，Yinyin Du，Shengmin Zhang
Dental Materials（Volume 36, Issue 6, June 2020, Pages 816-825）
13.Control the fate of human umbilical cord mesenchymal stem cells with dual-enzymatically cross-linked gelatin hydrogels for potential applications in nerve regeneration
JinruiLi，F(xiàn)engGao，ShanshanMa，YantingZhang，JunniZhang，F(xiàn)angxiaGuan，MinghaoYao
Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine
14.MG53 Protects hUC-MSCs against Inflammatory Damage and Synergistically Enhances Their Efficacy in Neuroinflammation Injured Brain through Inhibiting NLRP3/Caspase-1/IL-1β Axis
Shanshan Ma,Yaping Wang,Xinkui Zhou,Zhe Li,Zhenkun Zhang,Yingying Wang,Tuanjie Huang,Yanting Zhang,Jijing Shi,Fangxia Guan
ACS Chem. Neurosci. 2020, 11, 17, 2590–2601
15.Sodium alginate/collagen hydrogel loaded with human umbilical cord mesenchymal stem cells promotes wound healing and skin remodeling
Zhenkun Zhang, Zhe Li, Ya Li, Yingying Wang, Minghao Yao, Kun Zhang, Zhenyu Chen, Han Yue, Jijing Shi, Fangxia Guan & Shanshan Ma
Cell and Tissue Research
16.Reshaping the Immune Microenvironment by Oncolytic Herpes Simplex Virus in Murine Pancreatic Ductal Adenocarcinoma
Liming Zhang，Wei Wang，Ruikun Wang，Jie Yin，Hongkai Zhang，Youjia Cao
Molecular Therapy（VOLUME 29, ISSUE 2, P744-761, FEBRUARY 03, 2021）
17.Selective extracellular arginine deprivation by a single injection of cellular non-uptake arginine deiminase nanocapsules for sustained tumor inhibition
Hongzhao Qi,Yin Wang,Xubo Yuan,Peifeng Lia，Lijun Yang
Nanoscale
18.Inducing Apoptosis and Suppressing Inflammatory Reactions in Synovial Fibroblasts are Two Important Ways for Guizhi-Shaoyao-Zhimu Decoction Against Rheumatoid Arthritis
Zhang Q, Duan HX, Li RL, Sun JY, Liu J, Peng W, Wu CJ, Gao YX
Journal of Inflammation Research（26 January 2021 Volume 2021:14 Pages 217—236）
19.Injectable bone cement with magnesium-containing microspheres enhances osteogenesis via anti-inflammatory immunoregulation
Shenglong Tan，Yifan Wang，Yingying Du，Yin Xiao，Shengmin Zhang
Bioactive Materials Volume 6, Issue 10, October 2021, Pages 3411-3423
20.Propionate and butyrate produced by gut microbiota after probiotic supplementation attenuate lung metastasis of melanoma cells in mice
Lili Chen,Xinyu Zhou,Yawei Wang,Dake Wang,Yueshuang Ke,Xianlu Zeng
Molecular Nutrition & Food Research
21.Regulating the Anticancer Efficacy of Sgc8-Combretastatin A4 Conjugates: A Case of Recognizing the Significance of Linker Chemistry for the Design ofAptamer-Based Targeted Drug Delivery Strategies
Zhiyong Huang,Dan Wang,Cheng-Yu Long,Shen-Huan Li,Xue-Qiang Wang,Weihong Tan
Journal of American Chemical Society
參考文獻
1.Near-infrared upconversion–activated CRISPR-Cas9 system: A remote-controlled gene editing platform
應用方向：細胞活力檢測：A549細胞
暫無資料下載
 - 副本.png)
